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紫外分光光度计是一种基于物质分子对紫外可见光谱区辐射吸收原理进行分析的仪器。它通过测量物质在不同波长下的吸光度来实现对物质的定性、定量和结构分析。紫外分光光度计广泛应用于化学、生物、医药、环保等领域,是科研和工业生产中不可或缺的重要工具。
紫外分光光度计的工作原理:
紫外分光光度计的基本原理是基于物质对光的吸收具有选择性。不同物质具有各自独特的吸光带,当光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线会被溶液吸收。在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度呈一定比例关系,这一关系符合比尔定律(Beer-Lambert Law),即A=εbc,其中A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,b为液池厚度,c为溶液浓度。
紫外分光光度计的使用步骤:
开机预热:打开仪器电源,确保仪器充分预热。 设置光源和检测器:选择合适的波长范围及光源和检测器的位置。
背景校准:将空白试剂槽放入样品槽中,进行背景校准,记录光通过样品槽的基线吸收。
准备样品:将待测样品溶液放入样品槽中,确保无气泡或污渍。
设置波长:选择测量波长,调整仪器以使其与待测样品的最大吸收光谱相匹配。
开始测量:按下“开始”或“测量”按钮,仪器将测量样品吸收光谱。
记录结果:读取仪器显示屏上的吸收值,并记录结果。
清洁和关闭仪器:使用适当的清洁溶液清洁样品槽,关闭仪器。